%0 Journal Article %T Core2和Core4O-型糖链参与大肠杆菌对肠上皮细胞的黏附与侵袭 %A 刘韵 %A 叶钧 %A 宋丽丽 %A 田音 %A 潘琼 %A 彭志红 %A 汪荣泉 %J 第三军医大学学报 %P 105-109 %D 2014 %X 目的探讨大肠杆菌对Core2和Core4O-型糖链合成障碍的肠上皮细胞的黏附和侵袭的影响。方法采用针对C2GnT-2的干扰质粒和对照质粒对结肠癌HT-29细胞进行转染,通过G418筛选建立稳定转染的细胞系,采用Real-timePCR和Westernblot方法检测干扰效率,选取干扰最有效的稳定细胞系与肠致病性大肠杆菌(enteropathogenic?Escherichiacoli,EPEC)和肠出血性大肠杆菌(EHECO157∶H7)37℃共培养。最后采用系列稀释克隆计数法观察干扰Core2和Core4O-型糖链合成的C2GnT-2的HT-29细胞对细菌黏附及侵袭的影响。结果成功筛选获得shRNA-C2GnT-2及shRNA-Ctr稳定转染的HT-29细胞。Real-timePCR和Westernblot检测证实干扰质粒能够有效地抑制HT-29细胞内C2GnT-2的mRNA及蛋白水平表达(P<0.01),黏附于shRNA-C2GnT-2/HT-29细胞表面的EPEC或EHECO157∶H7的数量较对照细胞显著减少(P<0.01,P<0.05),而侵袭入shRNA-C2GnT-2/HT-29细胞内的EPEC或EHECO157∶H7的数量较对照细胞显著增加(P<0.01,P<0.05)。结论Core2和Core4O-型糖链参与了肠上皮细胞细菌的黏附与侵袭。 %K 黏蛋白 %K 大肠杆菌 %K O-型糖链 %K CGnT- %K 细胞黏附 %K 侵袭 %U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201308003