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ISSN: 2333-9721
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低浓度亚砷酸钠抑制Oct4、Sox2基因表达诱导肝癌干细胞分化

, PP. 116-121

Keywords: 肝细胞癌,肝癌干细胞,亚砷酸钠,Oct,Sox

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Abstract:

目的观察HepG2、Hep3B、HuH7和SMCC-7721细胞对亚砷酸钠的反应,CD133及CD13分子的表达和肿瘤球形成的差异,分析低浓度亚砷酸钠处理前后HuH7和原代HCC细胞Oct4、Sox2因子的表达变化,探讨低浓度亚砷酸钠对HCC细胞生长的抑制机制。方法CCK-8法检测0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0μg/mL不同浓度亚砷酸钠处理48、72、96h对HepG2、Hep3B、HuH7和SMCC-7721细胞生长的抑制作用;分析HepG2、Hep3B、HuH7、SMCC-7721和原代HCC细胞CD13、CD133表达及肿瘤球形成能力,确定是否含肝癌干细胞(LCSCs);观察0.5μg/mL亚砷酸钠处理HuH7和原代HCC细胞前后Oct4和Sox2基因和蛋白表达的变化,分析低浓度亚砷酸钠对LCSCs有何作用。结果亚砷酸钠处理HCC细胞48、72、96h,亚砷酸钠明显抑制HepG2、Hep3B、HuH7和SMCC-7721细胞生长,对HCC细胞增殖抑制作用与浓度和作用时间有关。亚砷酸钠处理HCC细胞96h,0.2、0.4μg/mL亚砷酸钠已经明显抑制SMCC-7721细胞生长(P<0.05,P<0.01)。0.4μg/mL亚砷酸钠明显抑制HepG2(P<0.01)和Hep3B(P<0.01)细胞增殖。0.1、0.2、0.4、0.6μg/mL亚砷酸钠刺激HuH7细胞增殖,但差异无统计学意义(P>0.05),0.8μg/mL亚砷酸钠非常明显抑制HuH7细胞增殖(P<0.01)。亚砷酸钠对HuH7细胞存在低浓度刺激HuH7细胞增殖和较高浓度抑制HuH7细胞增殖的双向作用,随着作用时间延长,相同浓度下抑制作用增强。低浓度亚砷酸钠对SMCC-7721、HepG2和Hep3B细胞几乎无刺激增殖作用。HepG2、Hep3B和SMCC-7721既不表达CD133,也不形成肿瘤球。HuH7和原代HCC细胞同时表达CD133、CD13标志,也具有形成肿瘤球能力,HuH7和原代HCC细胞含有CD133+CD13+LCSCs。HuH7和原代HCC细胞表达Oct4和Sox2基因和蛋白,0.5μg/mL亚砷酸钠可以下调HuH7和原代HCC细胞Oct4和Sox2基因和蛋白表达。结论低浓度亚砷酸钠下调或抑制含CD133+CD13+LCSCs的HuH7和原代HCC细胞Oct4和Sox2基因和蛋白表达,推测低浓度亚砷酸钠可能诱导LCSCs分化。

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