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大豆科学 2012
豆豉纤溶酶基因的克隆及其在枯草杆菌中的表达DOI: 10.3969/j.issn.1000-9841.2012.01.037, PP. 159-161 Keywords: 豆豉纤溶酶,基因克隆,高效表达,枯草芽孢杆菌 Abstract: 以实验室筛选的UD8豆豉芽孢杆菌的总DNA为模板,应用PCR技术根据豆豉纤溶酶基因DNA序列?(GeneBankAY720895.2)设计并合成1对引物,扩增出了豆豉纤溶酶基因,将该基因克隆到大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭质粒EC-BS8上,构建成表达质粒EC-BS8,再将其转化到枯草芽孢杆菌Bs6中。筛选表达菌株,实现了豆豉纤溶酶基因在枯草杆菌中高效表达。获得重组菌纤溶酶活力高达9830IU?mL-1,是出发菌株活力的2.9倍。经纯化SDS-PAGE鉴定重组豆豉纤溶酶相对分子质量为31.0kDa。
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