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中国公共卫生 2012
幽门螺杆菌GroEL基因真核表达载体构建及鉴定DOI: 10.11847/zgggws2012-28-03-32, PP. 331-332 Keywords: 幽门螺杆菌,热休克蛋白60,GroEL,基因疫苗 Abstract: ？目的构建幽门螺杆菌热休克蛋白GroEL基因的真核表达载体pcDNA3.0-GroEL,为幽门螺杆菌的基因疫苗研制提供参考依据.方法提取幽门螺杆菌基因组DNA,PCR扩增GroEL基因,克隆至pMD19-T载体,通过PCR、酶切及测序鉴定后,将GroEL基因片段用限制性内切酶切下,克隆至真核表达载体pcDNA3.0,构建pcDNA3.0-GroEL重组质粒;采用PCR、酶切对重组质粒pcDNA3.0-GroEL进行鉴定.结果扩增出幽门螺杆菌GroEL基因片段约1640bp;pcDNA3.0-GroEL重组质粒经XhoⅠ和EcoRⅠ双酶切,产生1个与GroEL基因PCR产物大小一致的小片段和1个不同于pcDNA3.0-GroEL重组质粒的大片段,表明GroEL基因已成功插入pcDNA3.0质粒中.结论成功构建幽门螺杆菌GroEL基因真核表达载体pcDNA3.0-GroEL.
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