%0 Journal Article %T 幽门螺杆菌GroEL基因真核表达载体构建及鉴定 %A 李波清 %A 张玉梅 %A 李娜 %A 吴玉龙 %A 耿丽 %J 中国公共卫生 %P 331-332 %D 2012 %R 10.11847/zgggws2012-28-03-32 %X ?目的构建幽门螺杆菌热休克蛋白GroEL基因的真核表达载体pcDNA3.0-GroEL,为幽门螺杆菌的基因疫苗研制提供参考依据.方法提取幽门螺杆菌基因组DNA,PCR扩增GroEL基因,克隆至pMD19-T载体,通过PCR、酶切及测序鉴定后,将GroEL基因片段用限制性内切酶切下,克隆至真核表达载体pcDNA3.0,构建pcDNA3.0-GroEL重组质粒;采用PCR、酶切对重组质粒pcDNA3.0-GroEL进行鉴定.结果扩增出幽门螺杆菌GroEL基因片段约1640bp;pcDNA3.0-GroEL重组质粒经XhoⅠ和EcoRⅠ双酶切,产生1个与GroEL基因PCR产物大小一致的小片段和1个不同于pcDNA3.0-GroEL重组质粒的大片段,表明GroEL基因已成功插入pcDNA3.0质粒中.结论成功构建幽门螺杆菌GroEL基因真核表达载体pcDNA3.0-GroEL. %K 幽门螺杆菌 %K 热休克蛋白60 %K GroEL %K 基因疫苗 %U http://manu40.magtech.com.cn/Jweb_zgggws/CN/abstract/abstract9347.shtml