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ISSN: 2333-9721
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草业学报  2011 

抗冻基因CBF2表达载体构建及转化紫花苜蓿的研究

, PP. 193-200

Keywords: 抗冻基因CBF2,载体构建,农杆菌,紫花苜蓿,转化

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Abstract:

本研究以拟南芥基因组DNA为模板,用PCR方法扩增目的基因,连接到PGEM-TEasyVector载体上构建成克隆载体T-CBF2。用BamHⅠ和SacⅠ分别对克隆载体T-CBF2和植物表达载体PBI121进行双酶切,获得目的片段和线性质粒。在T4DNA连接酶的作用下进行定向连接,构建成植物表达载体P-T-CBF2。采用直接转化法将重组子导入根癌农杆菌EHA105。经PCR鉴定,重组质粒已成功导入根癌农杆菌中。通过农杆菌介导法转化和田苜蓿,现在已经得到转基因的苜蓿愈伤组织。

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