%0 Journal Article %T 抗冻基因CBF2表达载体构建及转化紫花苜蓿的研究 %A 刘晓静 %A 郝凤 %A 张德罡 %A 毛娟 %A 于铁峰 %J 草业学报 %P 193-200 %D 2011 %X 本研究以拟南芥基因组DNA为模板,用PCR方法扩增目的基因,连接到PGEM-TEasyVector载体上构建成克隆载体T-CBF2。用BamHⅠ和SacⅠ分别对克隆载体T-CBF2和植物表达载体PBI121进行双酶切,获得目的片段和线性质粒。在T4DNA连接酶的作用下进行定向连接,构建成植物表达载体P-T-CBF2。采用直接转化法将重组子导入根癌农杆菌EHA105。经PCR鉴定,重组质粒已成功导入根癌农杆菌中。通过农杆菌介导法转化和田苜蓿,现在已经得到转基因的苜蓿愈伤组织。 %K 抗冻基因CBF2 %K 载体构建 %K 农杆菌 %K 紫花苜蓿 %K 转化 %U http://cyxb.lzu.edu.cn/CN/abstract/abstract3180.shtml