甘薯丛枝病植原体的PCR检测

？以报道的植原体(Phytoplasma)16SrDNA基因保守序列为依据，设计合成了两对引物对R16mF2/R16mR2和R16F2/R16R2，以甘薯丛枝病（SPWB）带病植株的叶脉中提取的DNA为模板，应用聚合酶链式反应（PCR）技术和巢式PCR（Nested-PCR）技术对甘薯丛枝病病原进行分子检测。结果表明PCR扩增出了1.5　kb的特异片段，在PCR基础上的巢式PCR扩增出了1.2　kb的特异片段。灵敏度实验显示该方法所需PCR模板DNA量为0.1073　ng/μl，在PCR基础上的巢式PCR可以将灵敏度提高约10000倍，所需模板DNA仅为0.01073　pg/μl，在甘薯丛枝病的检测中是一种快速、灵敏、可靠的方法。