斑节对虾cdk2基因全长cdna克隆及表达分析

该研究以斑节对虾（penaeusmonodon）cdna文库中的cdk2片段为基础，利用race技术获得pmcdk2的cdna全长，并利用生物信息学对其进行了分析。pmcdk2基因全长1679bp，包括编码306个氨基酸的921bp的开放阅读框（orf），258bp的5′utr和500bp的3′utr。同源性分析显示，pmcdk2与罗氏沼虾（macrobrachiumrosenbergii）等物种的cdk2具有较高的同源性。使用荧光定量pcr技术研究了pmcdk2的mrna在不同组织和卵巢发育各时期的相对表达量和变化模式，结果显示，pmcdk2在斑节对虾的脑、心、淋巴、肝胰腺、性腺等组织中均有表达，其中精巢中表达量显著高于其他组织；卵巢发育阶段表达分析则显示pmcdk2在ⅲ期表达量最高，其次是ⅳ期。通过原核表达技术成功获得了含有6个his标签的融合蛋白，并对融合蛋白进行westernblot试验，初步探讨了重组蛋白表达情况。上述结果表明，pmcdk2基因在斑节对虾卵巢发育过程中可能发挥了重要作用，该结果对进一步探究斑节对虾卵巢发育机理提供一定的理论依据。