%0 Journal Article %T 斑节对虾cdk2基因全长cdna克隆及表达分析 %A 戴文婷 %A 傅明骏 %A 赵超 %A 周发林 %A 李伟杰 %A 杨其彬 %A 王艳 %A 史进选 %A 邱丽华 %J 南方水产科学 %P 1-11 %D 2015 %R 10.3969/j.issn.2095-0780.2015.02.001 %X 该研究以斑节对虾(penaeusmonodon)cdna文库中的cdk2片段为基础,利用race技术获得pmcdk2的cdna全长,并利用生物信息学对其进行了分析。pmcdk2基因全长1679bp,包括编码306个氨基酸的921bp的开放阅读框(orf),258bp的5′utr和500bp的3′utr。同源性分析显示,pmcdk2与罗氏沼虾(macrobrachiumrosenbergii)等物种的cdk2具有较高的同源性。使用荧光定量pcr技术研究了pmcdk2的mrna在不同组织和卵巢发育各时期的相对表达量和变化模式,结果显示,pmcdk2在斑节对虾的脑、心、淋巴、肝胰腺、性腺等组织中均有表达,其中精巢中表达量显著高于其他组织;卵巢发育阶段表达分析则显示pmcdk2在ⅲ期表达量最高,其次是ⅳ期。通过原核表达技术成功获得了含有6个his标签的融合蛋白,并对融合蛋白进行westernblot试验,初步探讨了重组蛋白表达情况。上述结果表明,pmcdk2基因在斑节对虾卵巢发育过程中可能发挥了重要作用,该结果对进一步探究斑节对虾卵巢发育机理提供一定的理论依据。 %K 斑节对虾 %K cdk2 %K 实时荧光定量pcr %K 原核表达 %K 卵巢发育 %U http://www.schinafish.cn/CN/abstract/abstract9208.shtml