鲢抗菌肽hepcidin的基因克隆和表达及抑菌活性分析

利用同源克隆的方法从鲢（hypophthalmichthysmolitrix）的肝脏中克隆出抗菌肽hepcidincdna（genbank登入号kf312213）后，通过pet32a（+）构建含抗菌肽hepcidin的重组质粒的pet-hep/rosetta菌株，在37℃、28℃和16℃下分别用0.5mmol？l-1和1.0mmol？l-1iptg诱导表达，产物用nisepharosetm亲和层析柱纯化并进行体外抑菌试验。鲢hepcidincdna总长度755bp，orf为282bp，5'utr为108bp，3'utr为365bp，编码93氨基酸，信号肽24个氨基酸，前域42个氨基酸和成熟肽27个氨基酸。pet-hep/rosetta在28℃和16℃主要是可溶性表达，37℃主要是包涵体表达。纯化的产物经15%sds-page电泳验证为目的产物。目的产物、pet32/rosetta产物以及氟苯尼考的体外抑菌试验表明，目的表达产物对无乳链球菌（streptococcusagalactiae）、金黄色葡萄球菌（staphylococcusaureus）、嗜水气单胞菌（aeromonashydrophila)等具有很好的抑菌效果。