%0 Journal Article %T 鲢抗菌肽hepcidin的基因克隆和表达及抑菌活性分析 %A 周卫军 %A 刘振兴 %A 柯浩 %A 马艳平 %A 郝乐 %A 徐明芳 %J 南方水产科学 %P 58-64 %D 2014 %R 10.3969/j.issn.2095-0780.2014.03.009 %X 利用同源克隆的方法从鲢(hypophthalmichthysmolitrix)的肝脏中克隆出抗菌肽hepcidincdna(genbank登入号kf312213)后,通过pet32a(+)构建含抗菌肽hepcidin的重组质粒的pet-hep/rosetta菌株,在37℃、28℃和16℃下分别用0.5mmol?l-1和1.0mmol?l-1iptg诱导表达,产物用nisepharosetm亲和层析柱纯化并进行体外抑菌试验。鲢hepcidincdna总长度755bp,orf为282bp,5'utr为108bp,3'utr为365bp,编码93氨基酸,信号肽24个氨基酸,前域42个氨基酸和成熟肽27个氨基酸。pet-hep/rosetta在28℃和16℃主要是可溶性表达,37℃主要是包涵体表达。纯化的产物经15%sds-page电泳验证为目的产物。目的产物、pet32/rosetta产物以及氟苯尼考的体外抑菌试验表明,目的表达产物对无乳链球菌(streptococcusagalactiae)、金黄色葡萄球菌(staphylococcusaureus)、嗜水气单胞菌(aeromonashydrophila)等具有很好的抑菌效果。 %K 鲢 %K hepcidin %K 基因克隆 %K 原核表达 %K 抑菌效果 %U http://www.schinafish.cn/CN/abstract/abstract9133.shtml