苹果mxirt1基因的克隆与原核表达

根据植物irt(ironregulatedtransporter)家族的功能保守区设计引物,通过race法从缺铁胁迫处理的小金海棠根系cdna文库中克隆得到了fe2+转运蛋白基因cdna全长,将其命名为mxirt1(malusxiaojinensisironregulatedtransporter1)。将mxirt1cdna片段与pet30a构建原核表达载体peirt,转化大肠杆菌bl21。sds-page电泳检测结果表明,以30℃、0.5mmol·l-1iptg诱导该基因表达效果最好,诱导产物为一个40kd的蛋白。为进一步纯化和鉴定目的蛋白提供了试验基础。