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园艺学报 2013
基因枪介导红叶石楠遗传转化因素分析, PP. 2280-2286 Keywords: 以红叶石楠(photiniafraseri)的胚性愈伤组织为受体材料,利用基因枪法导入外源抗寒基因rd29a,以期建立基因枪转化红叶石楠的技术体系。结果表明,基因枪转化红叶石楠的最佳组合条件为,胚性愈伤组织在诱导培养基ms+6-ba2.0mg·,l-1+naa5.0mg·,l-1+2,4-d0.5mg·,l-1+琼脂5.0g·,l-1+蔗糖20g·,l-1里,用0.3mol·,l-1甘露醇处理15~16h,基因枪轰击时添加12.5mol·,l-1氯化钙50μl+0.1mol·,l-1亚精胺50μl,每枪含金粉300μg+质粒dna3.0μg,轰击距离9cm,轰击压力1100psi,轰击次数1次。经多次筛选获得了6株转基因植株,转化植株经pcr检测和southern分析,证实了rd29a已经整合到红叶石楠基因组中。 Abstract: 以红叶石楠(photiniafraseri)的胚性愈伤组织为受体材料,利用基因枪法导入外源抗寒基因rd29a,以期建立基因枪转化红叶石楠的技术体系。结果表明,基因枪转化红叶石楠的最佳组合条件为:胚性愈伤组织在诱导培养基ms+6-ba2.0mg·l-1+naa5.0mg·l-1+2,4-d0.5mg·l-1+琼脂5.0g·l-1+蔗糖20g·l-1里,用0.3mol·l-1甘露醇处理15~16h;基因枪轰击时添加12.5mol·l-1氯化钙50μl+0.1mol·l-1亚精胺50μl,每枪含金粉300μg+质粒dna3.0μg,轰击距离9cm,轰击压力1100psi,轰击次数1次。经多次筛选获得了6株转基因植株,转化植株经pcr检测和southern分析,证实了rd29a已经整合到红叶石楠基因组中。
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