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麦类作物学报 2007
转基因小麦的定性PCR筛选检测技术DOI: 10.7606/j.issn.1009-1041.2007.03.093, PP. 378-381 Keywords: 小麦,转基因,PCR,定性检测,转基因,小麦,筛选检测,检测技术,Transgenic,Wheat,Components,Modified,Detecting,通用性,检测方法,检测灵敏度,结果,确证实验,实时荧光定量,大小,预期,凝胶电泳分析,琼脂糖,优化,反应条件 Abstract: 为了建立转基因小麦的PCR检测方法标准,以B73、B72、B102三个被转入外源高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)基因的转基因小麦品系为材料,对目前国内外转基因小麦中通用的标记基因bar和uidA、NOS终止子和Ubiquitin启动子进行了定性PCR的筛选检测,在国内外首次找到了小麦中特有的内参照基因麦谷醇溶蛋白基因(GAG56D),设计并合成了麦谷醇溶蛋白基因(GAG56D)和Ubiquitin启动子的引物序列,并对PCR反应条件进行了优化,PCR产物经过琼脂糖凝胶电泳分析后,可以检测到预期大小的目的片段.同时对PCR产物用实时荧光定量PCR进行了确证实验,并得到预期的结果.定性PCR最低检测灵敏度为0.5%(w/w).建立的转基因小麦定性PCR筛选检测方法具有通用性.
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