死亡肽基因的合成及在大肠杆菌中的表达

将人工合成的寡核苷酸片段，通过PCR扩增得到死亡肽（thanatin）基因，并将其克隆到表达载体pGEX-3X中，序列分析结果正确。经IPTG诱导，在大肠杆菌BL21中进行高效可溶性表达，表达量可达20%以上。融合蛋白通过GST亲和层析纯化，用肠激酶酶解表达产物，用SephadexG-25初步纯化得到具有抗菌活性的死亡肽。