Purificación y caracterización proteica de una cepa cubana del virus de la hepatitis A

Se purificó y se hizo la caracterización proteica de una de las cepas aisladas en Cuba del virus de la hepatitis A. Para ello se procedió a separar al virus de la célula infectada mediante pasos de extracción con detergentes, concentración por ultrafiltración y finalmente ultracentrifugación en gradiente discontinuo sacarosa-glicerol. Se determinó la concentración de proteínas, así como la actividad antigénica en las diferentes fracciones del gradiente. Para la caracterización proteica del microorganismo se analizaron, por electroforesis en gel de poliacrilamida y por Western Blotting, aquellas fraccciones con la mayor actividad específica. Se demostró que el material viral se purificó y concentró en las últimas fracciones del gradiente. Mediante la electrolisis y el Western Blotting se observaron las bandas correspondientes a las proteínas estructurales del virus de la hepatitis A. The purification and protein characterization of one of the Cuban isolated strains of hepatitis A virus was carried out. For this, it was necessary to separate the virus from the infected cell by extraction steps with detergents, concentration by ultrafiltration and finally, ultracentrifugation in saccharoseglycerol discontinuous gradient. Protein concentration, as well as the antigenic activity in the different fractions of the gradient were determined. For the protein characterization of the microorganism, those fractions with the greatest specific activity were analyzed by polyacrylamide gel electrophoresis and by Western blotting. It was shown that the viral material was purified and concentrated in the last fractions of the gradient. Bands corresponding to the structural proteins of hepatitis A were observed through electrophoresis and Western blotting.