Aplicación de un método alternativo al conteo en cámara de Neubauer para determinar la concentración de Trichomonas vaginalis

Se demostró que existe relación entre la concentración celular y la lectura de los parásitos en un lector de ELISA. Se determinó que la absorbancia tiene valores significativos en las longitudes de onda del rango visible y se escogió la longitud de onda mínima posible (450 nm) para garantizar un máximo de sensibilidad. Pudo comprobarse que ocurre un aumento significativo de la absorbancia (p<0,001) después de llenada la placa, que se estabiliza en el intervalo de 40 min hasta 4 h. Al aplicar 100, 150, 200 ó 300 μL por pozo de las diferentes concentraciones de células se demostró que el volumen óptimo era de 150 μL, se obtuvo un r2 = 0,9986, y resultaron altamente significativos el coeficiente de correlación (p<0,001) y la pendiente (p<0,001). En el intervalo de 5 x 104 a 1,5 x 107 células/mL se obtuvo un coeficiente de variación medio de 1,75 % (0,25-3,17 %). En estas condiciones el límite de cuantificación fue de 5,14 x 104 células/mL. Por último se demostró que hubo significación de la correlación entre el conteo en cámara de Neubauer y la densidad óptica. It was demonstrated that there is a relation of cell concentration with the parasite reading in an ELISA reader. It was determined that absorbance showed significant values in wavelengths of visible range and the possible minimum wavelength (450 nm)was chosen to guarantee the maximum sensitivity. Likewise, it was confirmed that absorbance significantly increased (p<0.001) after the plate was filled up, it stabilized in the 40m-2h time interval when applying 100, 150, 200 or 300 ml per well of the various cell concentrations, it was proved that the optimum volume was 150 ml, a r2= 0,9986 was reached, and the coefficient of correction(p<0,001) and the gradient(p<0,001)were highly significant. In the 5 x 104 to 1.5 x 107 cell/mL interval, there was an average variation coefficient of 1.75% (0.25-3.17%). Under these conditions, the quantification limit was 5,14 x 104 cell/mL. Finally, it was shown that the correlation of counting in Neubauer chamber and optical density was significant.