Purification and Characterization of Protease with High Stability in Organic Solvents
高强度耐有机溶剂蛋白酶的纯化及性质

分离纯化了自行筛选的耐有机溶剂的地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis YP1所产的溶剂稳定性蛋白酶.发酵液经硫酸铵沉淀、疏水层析及强阳离子交换层析纯化,得到电泳纯的蛋白酶;分子量约为28 kDa,纯化蛋白酶的比酶活达到1.18×105.U/mg,纯化倍数为37.2,酶活回收率为20.8%.纯化的YP1蛋白酶对50%(Ψ)的多种亲水或疏水有机溶剂具有很高的耐受性,其中50%(Ψ)的DMF和DMSO能显著促进YP1蛋白酶活力.YP1蛋白酶为Zn2+蛋白酶,最适反应温度为55℃,最适反应pH为10.0,pH 8.0～13.0范围内具有高活力.以酪蛋白为底物,YP1蛋白酶的米氏常数Km为0.048g/L.