Construction Fermentation of Engineered Strain and Properties of Recombinant γ-glutamyltranspeptidase
γ-谷氨酰基转肽酶（GGT）基因工程菌的构建及其发酵条件的初步研究

利用PCR技术以Bacillus subtilisSYU20016基因组DNA为模板,扩增出1.8kb编码γ-谷氨酰基转肽酶的基因ggt,将其连接到温控表达载体pBV220,得到重组载体pBV220-ggt,重组载体在大肠杆菌JM109中得到表达。SDS-PAGE分析显示融合表达产物的分子量大小为65kDa,同核酸序列测定的推导值相符。对含有ggt的基因工程菌进行表达研究表明:发酵培养温度为30℃,pH为7.2,装液量为20ml(250ml锥形瓶)的条件下42℃诱导4h后,重组菌的γ-谷氨酰基转肽酶酶活力达到6U/ml。目前报道的非基因工程菌(枯草芽孢杆菌NX-2)酶活最高仅为3.2U/ml。