Construction and expression of C3-BPI fusion protein (CB) in E. coli
补体C3与BPI活性区融合蛋白（CB）的构建与表达

补体C3和杀菌通透性增加蛋白(BPI)对血液中的病原体均有黏附、促吞噬甚至杀灭作用,但两者的作用机制不同,制备两者活性区融合蛋白,可能具有更好的清除血液病原的作用。通过重叠延伸PCR融合人补体C3的补体受体Ⅰ、Ⅲ两个结合区,同时调取了杀菌通透性增加蛋白(BPI)活性区段rBPI,先后将补体C3活性区与BPI蛋白功能区基因克隆入原核表达载体pET28a中,获得融合蛋白(CB)表达载体pET28-CB,在大肠杆菌中进行了高表达产量、可溶性表达等条件的摸索,CB融合蛋白主要以包涵体形式表达,Western印迹证明CB具有C3的抗原活性,将包涵体蛋白变性与复性后,利用Ni2 固相化的螯合SepharoseFastFlow亲和层析柱进行浓缩和纯化,最后得到了纯度较高的CB原核表达蛋白,纯化的CB具备C3抗原性。CB融合蛋白的构建和高效表达、纯化,为下步探讨其在促进血液病原清除上的功能鉴定和应用奠定了基础。