%0 Journal Article
%T Construction and expression of C3-BPI fusion protein (CB) in E. coli<br>补体C3与BPI活性区融合蛋白（CB）的构建与表达
%A GAN Hui
%A ZHOU Yong
%A WANG Quan-li
%A ZHAN Lin-sheng
%A <br>甘慧
%A 周勇
%A 王全立
%A 詹林盛
%J 中国生物工程杂志
%D 2007
%I 
%X 补体C3和杀菌通透性增加蛋白(BPI)对血液中的病原体均有黏附、促吞噬甚至杀灭作用,但两者的作用机制不同,制备两者活性区融合蛋白,可能具有更好的清除血液病原的作用。通过重叠延伸PCR融合人补体C3的补体受体Ⅰ、Ⅲ两个结合区,同时调取了杀菌通透性增加蛋白(BPI)活性区段rBPI,先后将补体C3活性区与BPI蛋白功能区基因克隆入原核表达载体pET28a中,获得融合蛋白(CB)表达载体pET28-CB,在大肠杆菌中进行了高表达产量、可溶性表达等条件的摸索,CB融合蛋白主要以包涵体形式表达,Western印迹证明CB具有C3的抗原活性,将包涵体蛋白变性与复性后,利用Ni2 固相化的螯合SepharoseFastFlow亲和层析柱进行浓缩和纯化,最后得到了纯度较高的CB原核表达蛋白,纯化的CB具备C3抗原性。CB融合蛋白的构建和高效表达、纯化,为下步探讨其在促进血液病原清除上的功能鉴定和应用奠定了基础。
%K The third component of complement (C3) Bactericidal-permeability increasing protein (BPI) Prokaryotic expression Inclusion body<br>补体C3
%K 杀菌通透性增加蛋白
%K 原核表达
%K 包涵体
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=951380788B355DEA7D75520FA3B199C9&aid=A4020F5899AD9788&yid=A732AF04DDA03BB3&vid=DB817633AA4F79B9&iid=B31275AF3241DB2D&sid=4AD960B5AD2D111A&eid=42425781F0B1C26E&journal_id=1671-8135&journal_name=中国生物工程杂志&referenced_num=0&reference_num=12