|
|
中国科学 生命科学 2003
Gβ1γ2蛋白的纯化及其与腺苷酸环化酶的互作关系Keywords: G蛋白Gβ1γ2亚基,表面胞质团共振(SPR),腺苷酸环化酶(AC),BIAcore技术,信号传导 Abstract: 对G蛋白Gβ1γ2亚基及偶联组分在信号传导中的作用进行了初步研究. 以离体昆虫细胞Sf9(Spodoptera frugiperda, 秋粘虫卵巢细胞)或H5(Trichoplusia ni, 粉纹夜蛾细胞)为生物反应器, 高效表达了G蛋白Gβ1γ2亚基. 用Ni-NTA亲和层析柱, 经快速蛋白纯化技术(FPLC)获得高纯度的GGβ1γ2. 活性测定表明, 纯化的GGβ1γ2能显著刺激腺苷酸环化酶(AC2)的活力. 应用基于表面胞质团共振现象的BIAcore技术, 采用生物传感芯片NTA(biosensor chip NTA)直接证明腺苷酸环化酶2 (AC2)的胞质末端C2区域为G蛋白Gβ1γ2亚基的结合区, 从而明确了二者互作的活性位点和结合位点同位于该区域.
|
