Initial functional analysis of the promoter region and coding region of Pib gene in transgenic rice
35S驱动Pib基因启动区和编码区的转基因初步分析

将包含Pib基因启动区及下游完整编码区的9.9 kb DNA片段克隆到双元载体pPZP2Ha3( ),构建了35S驱动的正义表达载体pNAR701(20.3 kb);同时将Pib基因编码区6 986～9 392 bp之间的DNA片段,克隆到双元载体pPZP2Ha3(-)中,构建了35S驱动的反义表达载体pNAR703(12.8 kb);用农杆菌介导法转入中感稻瘟病水稻品种R109中.PCR、Southern blot鉴定以及转基因T0代种子的潮霉素抗性鉴定证明,目的基因已经整合到R109基因组中,并能在后代稳定遗传.Northern blot分析表明含有启动区及下游完整编码的Pib基因片段在35S驱动下能够在转基因后代中表达.对T1代苗期转基因植株和分蘖期离体叶片进行抗稻瘟病初步分析,结果显示pNAR701转基因植株对稻瘟病生理小种ZD1和ZG1的抗性较对照增强,而转反义片段的pNAR703转基因植株对稻瘟病的抗性较对照减弱.