端粒酶反转录功能区基因的表达和纯化
Keywords: 端粒酶,反转录功能区基因,表达,纯化,pET载体,亲和层析
Abstract:
通过PCR技术扩增出hTRT的目的片段,克隆至表达载体pET28-b中并转化至BL21(DE3),经IPTG诱导后在52kDa处发现有外源基因的表达,密度扫描显示表达蛋白含量为20%。目标蛋白以包含体形存在,含8mol/L尿素和10mmol/L DTT的裂解缓冲液溶解的包含体采用金属螯合层析有效分离出目标蛋白,免疫印迹实验表明,诱导出的融合蛋白是端酶反转录功能区基因所编码的蛋白质。
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