pGV3850载体系统的改进研究

位于pGA 472上的nos-npt基因片段,经Hind Ⅲ/Sal I双酶完全消化,克隆到pBR 322的Hind Ⅲ/Sal I位点,将这一重组DNA转化E.coli HB101,在pGJ 28和R64 drd 11的mob功能和tra功能的帮助下,经重组后带有卡那霉素抗性基因的pBR 322可以进入农杆菌中,并经同源重组整合到农杆菌质粒pGV3850的T-DNA区。这样得到的是一个改良的pGV3 850系统。它除了具有pGV 3850系统原有特点之外,还具有一个新的特点:在中间载体pBR 322上带有Km~r标记基因,这就为能克隆到pBR322上的任何不带有标记的基因提供标记,便于转化后的筛选。