The expression of IBDV VP2 in chicken primary myoblast cells using the baculovirus vector
以杆状病毒为载体在鸡原代骨骼肌细胞中表达IBDV VP2基因

摘要：【目的】本研究旨在构建在鸡原代骨骼肌细胞中表达IBDV病毒VP2基因的重组杆状病毒。【方法】从IBDV适应细胞毒中提取RNA，用RT-PCR技术扩增VP2基因，将其克隆到自主构建的杆状病毒转移载体的CMV启动子之下，通过Bac-to-Bac系统获得VP2重组Bacmid，并将其转染Sf9昆虫 细胞，获得了VP2重组杆状病毒。重组病毒经扩增后以50个MOI感染鸡原代骨骼肌细胞，接种72h后裂解细胞收获蛋白。【结果】蛋白样品经SDS-PAGE和Western blot证实VP2蛋白获得表达，分子量约48kDa，与预测蛋白大小一致，且能被IBDV阳性血清所识别。【结论】重组杆状病毒可以有效地将VP2基因导入鸡原代细胞，并在CMV的启动下表达具有抗原性的VP2蛋白，本研究为研制IBDV及其他重要禽类传染病的杆状病毒载体疫苗奠定了基础。