%0 Journal Article %T The expression of IBDV VP2 in chicken primary myoblast cells using the baculovirus vector
以杆状病毒为载体在鸡原代骨骼肌细胞中表达IBDV VP2基因 %A Jingping Ge %A Dongni Gao %A Zhuangwei Lou %A Wenxiang Ping %A
葛菁萍 %A 高冬妮 %A 楼庄伟 %A 平文祥 %J 微生物学报 %D 2009 %I %X 摘要:【目的】本研究旨在构建在鸡原代骨骼肌细胞中表达IBDV病毒VP2基因的重组杆状病毒。【方法】从IBDV适应细胞毒中提取RNA,用RT-PCR技术扩增VP2基因,将其克隆到自主构建的杆状病毒转移载体的CMV启动子之下,通过Bac-to-Bac系统获得VP2重组Bacmid,并将其转染Sf9昆虫 细胞,获得了VP2重组杆状病毒。重组病毒经扩增后以50个MOI感染鸡原代骨骼肌细胞,接种72h后裂解细胞收获蛋白。【结果】蛋白样品经SDS-PAGE和Western blot证实VP2蛋白获得表达,分子量约48kDa,与预测蛋白大小一致,且能被IBDV阳性血清所识别。【结论】重组杆状病毒可以有效地将VP2基因导入鸡原代细胞,并在CMV的启动下表达具有抗原性的VP2蛋白,本研究为研制IBDV及其他重要禽类传染病的杆状病毒载体疫苗奠定了基础。 %K Keywords: IBDV %K VP2 protein %K baculovirus %K chicken primary myoblast cell %K expression
关键词:IBDV %K VP2基因 %K 杆状病毒 %K 鸡原代骨骼肌细胞 %K 表达 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=80DCD62EC765B0C1EED9C0989CB18DEB&yid=DE12191FBD62783C&vid=2A3781E88AB1776F&iid=9CF7A0430CBB2DFD&sid=BE411C407DAF4824&eid=8A87B19A95331EA5&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=0&reference_num=16