Improvement of Beer Anti-staling Capability by Genetically Modifying Industrial Brewing Yeast with High Glutathione Content
构建高产谷胱甘肽啤酒酵母基因工程菌提高啤酒抗老化能力的研究

根据同源重组的原理，将来源于啤酒酵母工业菌株G03的γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶基因（GSH1）和筛选标记Kan取代质粒pRJ-5中18S rDNA内部约340bp的DNA片段，构建重组质粒pRKG。以pRKG为模版，PCR得到以18S rDNA为整合位点包含GSH1和Kan的基因片段18S rDNA::(Kan-GSH1)。用此片段转化啤酒酵母工业菌株G03，通过G418抗性筛选得到啤酒酵母工程菌。实验室小试表明，工程菌的谷胱甘肽含量比受体菌株提高16.6%，啤酒的抗老化能力得到了显著提高，而常规指标没有发生显著变化。连续传代5次后胞内GSH含量基本不变遗传稳定性良好。由于表达γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶的基因来源于受体菌株自身，是通过自克隆技术改造工业啤酒酵母的一次有益的尝试。