The Construction of a Transgenic Yeast Strain Expression Phytase
植酸酶酵母工程菌的构建*

从无花果曲霉(Aspergillus ficuum)3．4322中用RT-PCR方法扩增出一条约1．4kb的特异性条带，DNA序列测定表明，目的片段为不含信号肽的植酸酶编码序列，全长1347bp。无花果曲霉(Aspergillus ficuum)3．4322phyA基因序列已在GenBank注册(注册号为：AF537344)。将该基因克隆到酵母表达载体pYES2中，构建成不带信号肽phyA基因的重组表达载体pYPA2。用醋酸锂法将pYPA2转进urd缺陷型的酿酒酵母(s．oeraisiae INVSc1)，筛选获得含植酸酶基因的酵母转化子。经半乳糖诱导表达后，用磷钼蓝显色(AMES)法对酵母菌体进行酶活测定，测出了明显的植酸酶活性，pYPA2胞内植酸酶活性约11．55IU／mL，表明无花果曲霉(Aspergillus ficuum)3．4322phyA基因能在酿酒酵母中表达。