Gene Cloning, Expression and Characterization of a Novel Phytase from Hafnia alvei
蜂房哈夫尼菌植酸酶基因appA的克隆、表达及酶学性质研究

从蜂房哈夫尼菌（Hafnia alvei）中克隆获得一个植酸酶编码基因appA, 该基因全长1335bp，编码444个氨基酸，其中前33个氨基酸为信号肽，成熟蛋白的理论分子量为45.2kD。将基因appA 克隆到大肠杆菌E. coli表达载体pET-22b(+)，并在大肠杆菌中表达, 表达产物具有植酸酶活性。对表达的酶蛋白进行纯化，并初步研究了该酶的酶学性质，结果表明：酶的作用最适pH值为4.5；在pH 2.0～10.0范围内, 酶活性保留80％以上；酶的作用最适温度为60℃；酶的比活性为356.7U/mg，酶动力学分析表明其K,/i>m为0.49mmol/L，Vmax为238U/mg；该酶对胰蛋白酶和胃蛋白酶有一定的抗性。该研究为哈夫尼菌属来源植酸酶的首次报道。