Cloning,Expression,Purification and Preliminary Crystallographic Analysis of Caenorhabditis elegans Enoyl-CoA Hydratase
线虫烯脂酰CoA水合酶的克隆、表达、纯化及初步晶体学分析

生物体β-氧化循环是脂肪酸氧化分解的主要途径，许多代谢疾病都与其密切相关。线虫β-氧化循环与人类相似，但线虫β-氧化循环的研究报道却很少。线虫基因C32E8.9编码的蛋白被WormBase命名为烯脂酰CoA水合酶（WormBase ID：CE29693），被推测具有催化β-氧化循环第二步反应的功能。作者将C32E8.9基因克隆到原核表达载体上，在大肠杆菌中获得高效表达，并分别纯化了母体蛋白以及硒代蛋白衍生物。多角度静态光散射实验表明该蛋白的聚合状态为三聚体。该蛋白在沉淀剂2-甲基-2,4-戊二醇的作用下形成可供衍射分析的六棱柱形状晶体，空间群为P21，晶胞参数为a=79.0?，b=82.4?，c=79.2?，α=γ=90.0°，β=120°，数据分析表明该晶体非单晶，是一种罕见的蛋白质“三晶”——包含三套晶格。