重寄生真菌盾壳霉pH信号通路中Pal相关基因的功能鉴定

[目的]研究pH信号通路（Pal）在重寄生真菌盾壳霉与寄主核盘菌互作过程中的作用。[方法]从盾壳霉全基因组信息中分析获得了6个Pal相关基因CmpalA、CmpalB、CmpalC、CmpalF、CmpalH和CmpalI的全编码序列和氨基酸序列，通过PEG介导的原生质转化技术获得了CmpalA、CmpalB、CmpalC、CmpalF和CmpalH等5个基因的敲除突变体，分析这些敲除突变体与野生型在菌落培养性状、重寄生能力、降解草酸能力、产生抗真菌物质能力等方面的差异。[结果]与野生型相比，在pH 6-8的条件下，5个Pal相关基因敲除突变体的菌丝生长受到显著抑制，这说明缺失Pal相关基因使盾壳霉对高pH值环境更加敏感。菌核重寄生试验发现5个Pal相关基因敲除突变体的重寄生能力均显著低于野生型。qRT-PCR试验结果表明，敲除Pal相关基因之后导致重寄生相关酶基因Cmch1、Cmg1和Cmsp1的表达量显著降低，而且pH信号通路下游的CmpacC基因的表达量也显著降低。Pal相关基因敲除突变体在pH 6条件下对草酸盐的降解能力显著高于野生型，同时这5个突变体在pH 8条件下产生抗真菌物质能力也显著高于野生型。[结论]pH信号通路相关基因的缺失影响盾壳霉对环境pH的响应。pH信号通路在盾壳霉与核盘菌互作中发挥重要作用，不仅影响盾壳霉的重寄生作用，而且还影响盾壳霉的草酸降解作用和抗真菌作用