高原鼠兔瘦素蛋白乳腺特异表达载体的构建及细胞表达

摘要 瘦素（Leptin）蛋白是调节机体能量代谢的关键因子之一。前期研究显示高原鼠兔Leptin蛋白发生了适应性进化。功能实验表明，在温暖或寒冷条件下高原鼠兔Leptin都通过减少食物摄取和增加能量消耗调节能量平衡，显示了其调节适应性产热过程的潜力。本研究以高原鼠兔Leptin cDNA为模板扩增高原鼠兔obese（ob）基因编码区序列504bp，改造并构建了哺乳动物真核细胞乳腺特异表达载体pBC1-lep，同时通过组织块法原代培养建立了奶山羊乳腺上皮细胞系，并通过pBC1-lep质粒脂质体法转染及转基因细胞的筛选，成功获得转染Leptin的阳性细胞。实验为利用转基因动物实现奶山羊乳腺中特异表达高原鼠兔Leptin提供了一条可能的途径，完成了乳腺特异真核表达载体的构建