不同合成方法对4种渔药人工抗原免疫 原性的影响

目的 建立4种常用渔药磺胺甲恶唑(sulfamethoxazole, SMZ)、新霉素(neomycin, NEO)、恩诺沙星(enrofloxacin, EF)和氟苯尼考(florfenico, FF)人工抗原合成及免疫原性的检测方法, 为其单克隆抗体制备及渔药残留快速检测奠定基础。方法 对4种渔药分别采用重氮化法、戊二醛法(GA)、碳二亚胺法(EDC)和混合酸酐法合成人工抗原。用紫外扫描法(UV)和聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)对人工合成抗原进行鉴定, 并用ELISA法检测人工抗原的免疫原性。结果 重氮化法与GA法都能合成SMZ人工抗原, 重氮化法合成抗原的紫外峰值与电泳条带位移更明显, 抗体效价为1×104; EDC法与GA法均可合成NEO人工抗原, 但EDC法合成抗原的电泳条带位移更加明显, 且抗体效价为1×104; 混合酸酐法合成EF人工抗原失败, EDC法可合成EF人工抗原且合成抗原的紫外峰值与电泳条带位移明显, 抗体效价为1×104; GA法合成的FF人工抗原的紫外峰值与电泳条带位移明显, 抗体效价高达1×105。结论 SMZ人工抗原的合成采用重氮化法较好, FF人工抗原的合成采用戊二醛法较好, NEO与EF人工抗原的合成采用碳二亚胺法较好