环丙氨嗪完全抗原的合成及免疫原性鉴定

目的 合成并鉴定环丙氨嗪(cyromazine, CA)人工抗原。方法 采用碳二亚胺法(1-(3- dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide hydrochloride, EDC)将环丙氨嗪与牛血清蛋白(bovine serum albumin, BSA)和鸡卵清蛋白(ovalbumin, OVA)分别偶联; 采用紫外分光光度法(ultraviolet spectrophotometry , UV)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE)和动物免疫对人工抗原进行鉴定。经过4次免疫, 间接ELISA测定小鼠血清抗体效价, 间接竞争ELISA测定血清灵敏性。结果 UV法和SDS-PAGE法结果初步显示半抗原环丙氨嗪和载体蛋白偶联成功; 小鼠血清效价均在1:6400以上, 2号小鼠多抗血清半数抑制浓度IC50为27.5 ng/mL。结论 本研究成功合成了环丙氨嗪的人工抗原, 为环丙氨嗪单克隆抗体制备奠定基础