红花查耳酮异构酶基因植物表达载体的构建及拟南芥转化

目的 构建红花查耳酮异构酶（CHI）基因的植物表达载体并在拟南芥中进行超表达验证该基因的功能。方法 将已经分离的红花CHI基因作为目的基因，在其两端引入BamH I和EcoR I酶切位点，构建含有35S启动子的植物超表达载体pBASTA-CHI，通过Flora-dip法将其转化到拟南芥中，并对转基因拟南芥T2代植株进行PCR和总黄酮量检测。结果 转基因拟南芥T2代植株的PCR检测，红花CHI基因已经初步整合到拟南芥基因组中，黄酮量检测表明，转红花CHI基因的拟南芥比野生型拟南芥中的黄酮量有所提高，最高提高到2.3倍。结论 成功构建了含有红花CHI基因的植物表达载体，并在拟南芥中进行超表达，获得了转基因拟南芥T2植株