臭牡丹总黄酮通过调控Wnt/β-catenin通路影响A549细胞上皮间质转化研究

目的 探讨臭牡丹总黄酮对人肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的作用及其机制。方法 将pcDNA3.1+空载体与S45位点突变的β-链蛋白（S45A-β-catenin）真核过表达载体转染A549细胞，给予臭牡丹总黄酮干预。MTT法检测细胞的相对存活率，划痕实验检测细胞迁移能力，Transwell小室侵袭实验检测细胞的侵袭能力，Western blotting法检测各组细胞β-catenin、上皮细胞钙黏蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（vimentin）、转录因子Snail 2（Slug）、糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）、p-GSK-3β的表达水平。结果 转染S45A-β-catenin质粒后，A549细胞增殖、迁移、侵袭能力均明显增强，β-catenin、vimentin蛋白表达水平显著上调，E-cadherin、GSK-3β、P-GSK-3β蛋白的表达水平显著下调。臭牡丹总黄酮可抑制A549细胞的增殖、迁移与侵袭能力，对转染S45A-β-catenin质粒组的细胞作用尤为明显。对转染空载质粒的A549细胞，可上调E-cadherin、GSK-3β、P-GSK-3β表达，下调β-catenin、vimentin表达；对转染S45A-β-catenin质粒的A549细胞，可下调β-catenin、vimentin表达。结论 抑制细胞中β-catenin的高表达并调控下游的一系列因子，从而影响Wnt/β-catenin通路诱导的上皮间质转化（EMT）现象可能是臭牡丹总黄酮抑制肺癌侵袭、转移的重要作用机制之一