塔斯品碱衍生物TasD1-6对肝癌Hep3B细胞生长的抑制作用研究

目的 考察塔斯品碱衍生物TasD1-6对肝癌细胞株Hep3B、HepG2和BEL7402的生长抑制作用及其作用机制。方法 应用MTT法和实时细胞分析（RTCA）技术检测TasD1-6对Hep3B、HepG2和BEL7402细胞增殖的影响，筛选敏感株后采用结晶紫染色进行细胞形态学观察，根据Annexin V FITC/PI双染法和Hoechst 33258染色法考察TasD1-6对细胞凋亡的影响，采用Western blotting法检测凋亡相关蛋白表达，流式细胞仪检测细胞周期变化。结果 MTT法和RTCA结果均表明TasD1-6能明显抑制Hep3B细胞的增殖，MTT检测其半数抑制浓度（IC50）值为（11.3±1.6）μmol/L，确定后续给药浓度分别为3、6、12 μmol/L；形态学观察结果表明TasD1-6高浓度下能明显抑制Hep3B细胞增殖，且细胞皱缩，形态发生明显变化；Annexin V FITC/PI双染法和Hoechst 33258染色法均表明TasD1-6可诱导细胞发生凋亡，且呈剂量依赖性；Western blotting结果表明TasD1-6可上调p53和促凋亡蛋白Bax表达，并下调抑凋亡蛋白Mcl-1表达；流式细胞仪检测细胞周期表明TasD1-6可将Hep3B细胞阻滞于G1期。结论 TasD1-6可抑制肝癌细胞增殖，其对Hep3B细胞作用最为显著，其作用机制可能为通过上调p53和促凋亡蛋白Bax，下调抑凋亡蛋白Mcl-1诱导细胞凋亡的产生，同时将细胞周期阻滞于G1期，抑制细胞增殖