LC-MS/MS法同时测定犬血浆中延胡索乙素和欧前胡素及其在元胡止痛片药动学研究中的应用

目的 建立同时测定Beagle犬血浆中的延胡索乙素和欧前胡素的LC-MS/MS分析方法，并应用于元胡止痛片的药动学研究。方法 采用液-液萃取方式进行样品处理，萃取剂为甲基叔丁基醚，内标为乙氧苯柳胺；采用XDB-C18（50 mm×4.6 mm，5 μm）柱色谱分离，柱温40℃，体积流量0.4 mL/min；流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液，梯度洗脱；采用电喷雾离子源（ESI）、正离子扫描、多反应离子监测（MRM）进行测定，延胡索乙素：m/z 356.2[M+H]+→m/z 192.1，欧前胡素：m/z 271.1[M+H]+→m/z 203.0，内标乙氧苯柳胺：m/z 258.1[M+H]+→m/z 121.1。应用WinNonlin 6.3软件非房室模型统计矩方法计算药动学参数。结果 延胡索乙素在0.05～20 ng/mL线性良好，欧前胡素在0.005～2 ng/mL线性良好，延胡索乙素和欧前胡素的定量下限分别为0.05 ng/mL和0.005 ng/mL；批内和批间精密度均小于14.4%，准确度均在-7.19%～5.89%；提取回收率在82.8%～108%，基质效应在88.2%～109%。Beagle犬po给予元胡止痛片后，延胡索乙素的主要药动学参数tmax、Cmax、AUC0~t、AUC0~∞、MRT0~t、MRT0~∞、Vd、CL和t1/2分别为（1.08±0.20） h、（48.70±18.10） ng/mL、（170.00±75.70） h？ng/mL、（178.00±77.50） h？ng/mL、（6.41±1.13） h、（8.09±1.85） h、（133.00±63.00） L、（11.90±5.54） L/h和（7.71±1.07） h；欧前胡素的主要药动学参数tmax、Cmax、AUC0~t、AUC0~∞、MRT0~t、MRT0~∞、Vd、CL和t1/2分别为（1.17±0.26） h、（0.063 4±0.023 5） ng/mL、（0.176 0±0.091 9） h？ng/mL、（0.204 0±0.097 3） h？ng/mL、（2.550±0.669） h、（3.640±0.818） h、（22 351±7 990） L、（7 917±6 030） L/h和（2.390±0.877） h。结论 该分析方法专属性强，灵敏度高，能同时测定犬血浆中延胡索乙素和欧前胡素，可用于元胡止痛片给药后犬的药动学研究