铁棍山药促进巨噬细胞吞噬细菌的高内涵分析方法研究

目的 建立巨噬细胞系RAW 264.7对绿色荧光蛋白标记的大肠杆菌（GFP-E. coli）吞噬活性的高内涵分析方法，评价铁棍山药在体外对巨噬细胞增殖和吞噬活性的促进作用。方法 采用CCK-8法测定铁棍山药作用于RAW 264.7巨噬细胞的增殖活性。采用高内涵技术，建立铁棍山药调节巨噬细胞RAW 264.7吞噬细菌活性的评价方法。结果 通过考察给药时间、细菌加入量、细菌刺激时间等因素，确定所建立方法的最佳方案为给药12 h、细菌加入量为50倍、细菌刺激时间1.5 h；方法重复性考察RSD值为2.31%。与不加药组相比，在铁棍山药质量浓度为0.156～1.25 mg/mL都能促进巨噬细胞的增殖，以及单个细胞的平均吞噬率；在1.25 mg/mL时铁棍山药促进巨噬细胞的增殖及吞噬活性的能力最强。结论 首次建立铁棍山药促进巨噬细胞吞噬活性的高内涵分析方法，该方法具有准确、直观、高通量等优势；铁棍山药在体外既能促进巨噬细胞增殖，又能提高单个细胞的吞噬能力，为进一步分析山药等补益类中药的免疫活性及增强免疫机制的研究提供新思路和新方法