人参中核黄素激酶基因的克隆与原核表达

目的 从人参中克隆出核黄素激酶基因，进行相关的生物信息学分析，构建原核表达载体并在大肠杆菌诱导表达。方法 根据人参转录组数据库筛选出序列comp61599_c0_seq12，经相关软件对其进行序列分析；该序列3'末端缺失，利用3'RACE技术获得3'端序列；通过PCR技术获得人参核黄素激酶基因的全长cDNA序列，并构建原核表达载体pET-32a-PgRFK，通过热激法转化到大肠杆菌BL-21中进行诱导表达。结果 从人参中成功克隆出1条长度为1 200 bp的核黄素激酶基因，其编码399个氨基酸，同时成功构建该基因的原核表达载体，SDS-PAGE电泳结果显示该蛋白大小与预测蛋白相对分子质量一致。结论 成功克隆了人参核黄素激酶基因，并在大肠杆菌中成功表达