三七多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因的克隆及表达分析

目的 克隆三七Panax notoginseng（Burk）F.H.Chen多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白（polygalacturonase-inhibiting protein，PGIP）基因（PnPGIP）的全长cDNA序列，分析该基因的表达特性。方法 根据三七中编码PGIP的EST（expressed sequence tag）序列设计引物，采用cDNA末端快速扩增技术克隆PnPGIP基因的全长cDNA序列；用qRT-PCR分析PnPGIP基因的表达水平。结果 PnPGIP基因的cDNA全长为1 171 bp，含有981 bp的开放阅读框，13 bp的5’-非翻译区以及177 bp的3’-非翻译区，编码含326个氨基酸的蛋白质，PnPGIP蛋白的相对分子质量约为36 770，等电点约为5.83；qRT-PCR分析结果显示，PnPGIP基因的表达量分别在三七接种茄腐镰刀菌和人参链格孢后4 h和2 h内迅速上升；此外，信号分子茉莉酸甲酯（methyl jasmonate，MeJA）、乙烯利（ethylene，ETH）、H2O2、水杨酸（salicylic acid，SA）处理均能不同程度地诱导PnPGIP基因的表达水平。结论 PnPGIP基因在转录水平响应茄腐镰刀菌和人参链格孢的侵染，并受几种逆境胁迫相关信号分子的诱导，PnPGIP基因可能参与三七对茄腐镰刀菌和人参链格孢的防卫反应