汉防己甲素联合紫杉醇逆转脑胶质瘤C6/MDR细胞耐药及其机制研究

目的 评价汉防己甲素联合紫杉醇（paclitaxel，PTX）逆转耐药型脑胶质瘤（C6/MDR）细胞多药耐药的可行性，并探讨可能的耐药逆转机制。方法 通过非耐药型脑胶质瘤C6和耐药型脑胶质瘤C6/MDR细胞系作对比，以体外细胞毒性为指标，采用MTT法分别考察PTX、汉防己甲素、PTX+汉防己甲素抑制C6和C6/MDR细胞增殖作用差异；以细胞摄取能力为指标，借助HPLC和流式细胞仪技术分别测定PTX和荧光探针罗丹明123（R123）在2种细胞内的含量，评价汉防己甲素促C6/MDR细胞摄取PTX和R123的能力；以细胞凋亡率为指标，采用AnnexinV-PE/7-AAD一步染色法定量PTX、汉防己甲素、PTX+汉防己甲素干预后的2种细胞凋亡率；采用P-糖蛋白（P-gp）抗体结合试剂盒和Pgp-GloTM分析系统分别考察汉防己甲素对C6/MDR细胞P-gp表达以及P-gp ATP酶活性的影响。结果 汉防己甲素+PTX对C6/MDR细胞的半数抑制浓度（IC50，以PTX浓度计）为（5.88±0.43） nmol/L；在10 μmol/L汉防己甲素的干预下，C6/MDR细胞内的PTX和R123累积量相比PTX组分别提高9.4倍和12.3倍，凋亡率相应提高了2.3倍；这种汉防己甲素介导的耐药逆转机制可能与降低C6/MDR细胞P-gp表达、刺激细胞内P-gp ATP酶活性有关。结论 汉防己甲素联合紫杉醇在体外具有逆转C6/MDR细胞耐药的潜力