星点设计-效应面法优化牛樟芝总三萜提取工艺及其抗肿瘤活性研究

目的 研究牛樟芝总三萜（ACTT）提取工艺及其抗肿瘤活性。方法 采用星点设计-效应面法（CCD-RSM）优化ACTT的提取工艺；通过MTT法检测其对人肝癌HepG2细胞体外增殖抑制作用；以最佳质量浓度的ACTT提取物（ACTTE）处理HepG2细胞，应用荧光显微镜进行形态学观察；应用AnnexinV凋亡检测试剂盒进行流式细胞分析，应用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 优化的工艺为加20倍量的90%乙醇，超声提取2次，每次40 min，超声功率400 W，ACTT提取率达11.87%，实际值与预测值的偏差为1.56%；不同质量浓度（12.5~200 μg/mL）的ACTTE对HepG2细胞的增殖均有明显的抑制作用（P<0.01）；直接形态显微观察及Hoechst33342荧光染色可观察到核浓缩及核碎裂等典型细胞凋亡特征及凋亡小体；流式细胞仪结果显示，给药组细胞凋亡率与空白组相比，有显著差异（P<0.01）。结论 CCD-RSM优化牛樟芝的超声醇提工艺，实际值与预测值吻合度高，预测性良好，是可行的；ACTTE体外对HepG2细胞有明显的增殖抑制及诱导凋亡的作用