丹红注射液对共培养体系中平滑肌细胞舒张的影响及其作用机制研究

目的 研究丹红注射液在共培养体系中通过人脐静脉内皮细胞(Ea.Hy926)对大鼠胸主动脉平滑肌细胞(A7r5)舒张的影响及其作用机制。方法 以A7r5、Ea.Hy926为细胞模型,用Western blotting法检测丹红注射液对单独培养的A7r5细胞中肌球蛋白轻链(MLC)和磷酸化MLC(P-MLC)蛋白表达的影响;检测其对A7r5细胞内钙离子浓度的影响;用RT-PCR法检测A7r5细胞钙调蛋白(CaM)mRNA表达的变化,MTT法观察其对重组人血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)诱导的A7r5细胞增殖的影响;最后用Transwell小室建立共培养体系,分别用Western blotting法和ELISA法检测丹红注射液对共培养体系中A7r5细胞MLC、P-MLC的蛋白表达以及环磷酸腺苷(cAMP)分泌的影响。结果 丹红注射液(10μL/mL)能降低单独培养的A7r5细胞中P-MLC/MLC的值(P<0.05)和CaM mRNA表达(P<0.01),对细胞内钙离子浓度和MLC蛋白表达无显著影响,也可降低共培养体系中A7r5细胞P-MLC/MLC值(P<0.05),并增加cAMP的分泌(P<0.01),此外还能抑制PDGF-BB诱导的A7r5细胞增殖(P<0.01)。结论 丹红注射液能通过降低P-MLC/MLC值和CaM的mRNA表达直接使平滑肌舒张,也能通过促进内皮细胞释放舒血管因子间接增加共培养体系中平滑肌细胞cAMP的分泌,使平滑肌细胞舒张