黄芪甲苷对Aβ1-42诱导的体外血脑屏障模型损伤的影响及机制探究

目的 探究黄芪甲苷对纤维状Aβ1-42诱导的体外血脑屏障（BBB）模型损伤的影响及可能机制。方法 制备Aβ1-42诱导的小鼠脑微血管内皮细胞bEnd.3和原代大鼠星形胶质细胞As非接触式共培养BBB模型，分为对照组、模型组（Aβ1-42 30 μmol/L）及黄芪甲苷低、高剂量（50、200 μmol/L）组；利用噻唑蓝（MTT）法检测黄芪甲苷对Aβ1-42诱导的bEnd.3细胞活力的影响；通过检测荧光素钠透过体外BBB模型的量鉴定BBB的通透性；Western blotting法检测细胞凋亡执行蛋白半胱天冬蛋白酶-3（Caspase-3）、活化的半胱天冬蛋白酶-3（cleaved Caspase-3）的表达水平以及BBB内皮细胞间相关连接蛋白细胞质透明带蛋白-1（ZO-1）、Claudin-5、Occludin的表达水平。结果 MTT结果显示，与模型组比较，黄芪甲苷低、高剂量组均能显著提高bEnd.3细胞活性（P<0.001），且保护作用与黄芪甲苷浓度呈正相关；荧光素钠通透性实验结果显示，与模型组相比较，黄芪甲苷预处理可显著降低BBB的通透性（P<0.001）。Western blotting结果显示，与模型组比较，黄芪甲苷预处理后，cleaved Caspase-3/Caspase-3显著降低，ZO-1、Claudin-5、Occludin蛋白的表达水平显著增加（P<0.001）。结论 黄芪甲苷可能是通过抑制Aβ1-42诱导的脑微血管内皮细胞bEnd.3的凋亡及增加其连接蛋白表达而发挥BBB保护作用