市售中药材冬葵子和苘麻子ITS2条形码鉴定

目的 利用ITS2条形码序列对市售中药材冬葵子、苘麻子进行分子鉴定，以保证药材使用的正确性和临床药效。方法 收集冬葵子、苘麻子及其3种混伪品样品共87份。对实验样品进行ITS2基因片段扩增并双向测序，利用HMMer注释方法获得ITS2序列，再经CodonCode Aligner 6.0.2拼接，使用MEGA6.0进行种内、种间变异分析，遗传距离计算并构建NJ系统发育树；将所得序列转换成二维码图片，扫描识读后通过中药材DNA条形码数据库进行验证。结果 冬葵子和苘麻子外观形态相似；冬葵子ITS2序列长度232 bp；GC量为67.6%；苘麻子ITS2序列长度231 bp，GC量为54.1%，二者均无种内变异。冬葵子和苘麻子ITS2序列比对后长度为233 bp，共存在50个变异位点。鉴定结果显示，收集的56份冬葵子药材中26份均为苘麻子，剩余30份为正品。冬葵子和苘麻子与其他3个混伪品的K2P遗传距离为0.224~0.868，平均距离为0.630，种间遗传距离远大于种内遗传距离。基于ITS2序列构建系统发育树可见冬葵子、苘麻子及其3个混伪品各自单独聚成一支，ITS2序列能够明显将其区分；此外，使用二维DNA条形码扫描可准确验证5个物种。结论 ITS2序列能够成功鉴定冬葵子、苘麻子及其常见混伪品，为种子类药材鉴别提供了新工具；二维码技术与DNA条形码技术的结合可以为药材的基原物种提供准确唯一的二维DNA条形码信息，可更好实现药材市场的信息化监管