吴茱萸碱抑制HDAC6促进人白血病K562细胞周期阻滞和凋亡的机制研究

目的 探讨吴茱萸碱通过抑制组蛋白去乙酰化酶6（HDAC6）促进人白血病K562细胞周期阻滞以及凋亡的机制。方法 采用CCK-8法检测吴茱萸碱对K562细胞增殖的影响；流式细胞术检测K562细胞周期和凋亡；化学比色法检测K562细胞HDAC6活性；Western blotting法检测K562细胞中HDAC6、Cyclin D1、CDK4、Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3、ERK、p-ERK、p38和p-p38蛋白的表达。结果 CCK-8法结果提示，吴茱萸碱在一定浓度范围内（1～16 μmol/L）可以有效抑制K562细胞增殖，并呈时间和浓度依赖性；流式细胞术结果显示，吴茱萸碱可将K562的细胞周期阻滞于G0/G1期；2、4、8 μmol/L吴茱萸碱诱导K562细胞48 h后，其凋亡率分别为（11.47±1.05）%、（12.77±0.79）%和（18.58±1.37）%，与对照组（2.79±1.01）%相比差异显著（P<0.01）；化学比色法结果显示，吴茱萸碱能有效抑制HDAC6的活性；Western blotting结果显示，吴茱萸碱能上调Bax、Cleaved Caspase-3、p38和p-p38蛋白的表达，下调CDK4、Cyclin D1、Bcl-2、HDAC6、ERK和p-ERK蛋白的表达。结论 吴茱萸碱可能是通过抑制HDAC6的活性，激活MAPK信号通路，进而上调促凋亡蛋白的表达，下调周期蛋白的表达，从而抑制K562细胞的增殖，诱导细胞周期阻滞和凋亡