川芎咖啡酸-3-O-甲基转移酶的同源建模和定点突变

目的 构建川芎咖啡酸-3-O-甲基转移酶（Ligusticum chuanxiong caffeic acid-3-O-methyltransferase，LCCOMT）的三维模型，并利用定点突变对模型进行验证。方法 利用同源建模构建LCCOMT的初始三维模型；对初始三维模型进行动力学优化；将优化后的模型对接咖啡酸，预测LCCOMT的活性位点；对预测的活性位点展开定点突变，检测突变型蛋白的生物活性。结果 LCCOMT的三维模型能够与咖啡酸成功对接，His268残基可能是LCCOMT的活性位点，推测其能够与咖啡酸3-OH形成氢键。H268N与H268Q 2种突变酶分别丧失94.85%和95.28%的催促活性。结论 同源建模能够准确预测LCCOMT的三维模型。His268为LCCOMT的关键氨基酸残基，其作用可能是作为共轭碱，参与咖啡酸3-OH的去质子化反应